如果限制性内切核酸酶的识别位点位于 DNA分子的末端,那么接近末端的程度也影响切割,如 HpaⅡ和 MboI要求识别序列之前至少有一个碱基对存在才能切割。
DNA分子是由腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和()四种碱基组成的脱氧核糖核酸。
核酸是由4种不同的碱基、核糖和()组成的。核酸又有去氧核糖核酸(DNA)和()之分。
由于 DNA是由 4 种碱基组成的,所以任何限制性内切核酸酶的切割频率的理论值应该是()。
取代型载体(replacement vector)是指同一种限制性内切核酸酶在),DNA 中具有两个切点,外源 DNA通过取代这两个切点间的片段被克隆。
如果用限制性内切核酸酶切割双链 DNA 产生 5,突出的黏性末端,则可以用();进行 3’末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割 DNA 产生的是 3’突出的黏性末端,可以用()进行 3’末端标记。
限制性核酸内切酶,简称限制酶,是一类能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列,并在识别序列内或附近切割DNA双链结构的核酸酶。限制性核酸内切酶切割DNA后不会产生()
Ⅱ类限制性内切核酸酶一般识别()个碱基,也有识别多序列的限制性内切核酸酶。根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析,限制性内切核酸酶识别序列具有()倾向,即它们在识别序列中含量较高。 8.EcoK是 I类限制性内切核酸酶,分子组成是α2 β2 γ,分子量 300kDa。在这些亚基中,o 亚基具有()作用;β亚基具有() 的活性;γ亚基的作用则是()。
Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小.一般在 20~40kDa,通常由()亚基所组成。它们的作用底物为双链 DNA,极少数Ⅱ类酶也可作用于单链 DNA,或 DNA/RNA 杂合链。这类酶的专一性强,它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求,而且对更远的碱基也有要求,因此,Ⅱ类酶既具有()专一性,也具有()的专一性,一般在识别序列内切割。切割的方式有(),产生()末端的DNA片段或()的DNA片段。作用时需要()作辅助因子,但不需要()和()。
同一种限制性内切核酸酶切割靶 DNA,得到的片段的两个末端都是相同的。
限制性核酸内切酶,简称限制酶,是一类能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列,并在识别序列内或附近切割DNA双链结构的核酸酶。限制性核酸内切酶可分为多种类型,其中应用最广的是()
在DNA和RNA中,核苷酸残基以()互相连接,形成不分枝的链状分子。由于含氮碱基具有(),所以核苷酸和核酸在()nm处有最大紫外吸收值。
用一限制性内切核酸酶切割 Lac+Tetr的质粒载体,已知该酶识别的是4个碱基序列,并产生有两个碱基突出的单链末端,该酶在 lac 基因内有切割位点,并在第二个氨基酸密码子内,该位点可以被任何氨基酸所取代而不影响酶活性。用该酶切割后,用 DNA聚合酶将单链末端补齐为双链的平末端,然后重新连接成环,转化 Lac-Tets受体菌,筛选 Tet 转化子,问:Lacr的基因型是什么?并说明原因。
1970 年,Smith 和 Wilcox 从流感嗜血杆菌中分离到一种限制酶,能够特异性的切割 DNA,这个酶后来被命名为(),这是第一个分离到的Ⅱ类限制性内切核酸酶。
某一限制性核酸内切酶识别序列的碱基数为6个,24kb的一段随机序列出现该酶切割位点的数目是
粘性末端产生的途径之一,是限制性核酸内切酶通过()DNA产生的
限制性核酸内切酶切割DNA时可产生:
限制性核酸内切酶切割DNA后可产生
平头末端产生的途径之一,是限制性核酸内切酶通过()DNA产生的。
限制性核酸内切酶切割 DNA 时可产生:
限制性核酸内切酶切割 DNA 后产生
利用同一限制性内切酶作用产生的粘性末端的DNA片段,都能通过互补碱基配对连接。()
17、重组DNA技术常用的限制性核酸内切酶为:
用一限制性内切核酸酶切割Lac+Tetr的质粒载体,已知该酶识别的是4个碱基序列,并产生有两个碱基突出的单链末