限制性内切核酸酶 BglⅡ识别的序列为 A GATCT,BamHI 识别的序列为 GGATCC,用它们分别切割载体 DNA和供体 DNA,不必使酶失活,就可以直接通过黏性末端连接法进行连接。
限制性核酸内切酶是能识别几个特定核苷酸顺序的DNA水解酶。
取代型载体(replacement vector)是指同一种限制性内切核酸酶在),DNA 中具有两个切点,外源 DNA通过取代这两个切点间的片段被克隆。
如果用限制性内切核酸酶切割双链 DNA 产生 5,突出的黏性末端,则可以用();进行 3’末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割 DNA 产生的是 3’突出的黏性末端,可以用()进行 3’末端标记。
为什么使用限制性内切核酸酶对基因组DNA进行部分酶切?()
用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后,可用 E.coli DNA连接酶进行连接。
限制性核酸内切酶,简称限制酶,是一类能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列,并在识别序列内或附近切割DNA双链结构的核酸酶。限制性核酸内切酶切割DNA后不会产生()
能够产生防御病毒侵染的限制性内切核酸酶的细菌,其本身的基因组中没有被该核酸酶识别的序列。
限制性内切核酸酶 PstI切割质粒 pBR322后,再用外切核酸酶 ExoⅢ进行系列缺失,可得到一系列大小不同的缺失突变体。
用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA,得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。
用限制性内切酶切割得到的()基因,导入大肠杆菌细胞后不能得到有效的表达。
Ⅱ类限制性内切核酸酶一般识别()个碱基,也有识别多序列的限制性内切核酸酶。根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析,限制性内切核酸酶识别序列具有()倾向,即它们在识别序列中含量较高。 8.EcoK是 I类限制性内切核酸酶,分子组成是α2 β2 γ,分子量 300kDa。在这些亚基中,o 亚基具有()作用;β亚基具有() 的活性;γ亚基的作用则是()。
基因工程中使用的Ⅱ类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性,而且有甲基化酶的活性。
用限制性内切核酸酶切割载体、供体 DNA后,要加入 EDTA-SDS中止液使限制性内切核酸酶失活,这样有利于重组连接。
限制性核酸内切酶,简称限制酶,是一类能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列,并在识别序列内或附近切割DNA双链结构的核酸酶。限制性核酸内切酶可分为多种类型,其中应用最广的是()
用一限制性内切核酸酶切割 Lac+Tetr的质粒载体,已知该酶识别的是4个碱基序列,并产生有两个碱基突出的单链末端,该酶在 lac 基因内有切割位点,并在第二个氨基酸密码子内,该位点可以被任何氨基酸所取代而不影响酶活性。用该酶切割后,用 DNA聚合酶将单链末端补齐为双链的平末端,然后重新连接成环,转化 Lac-Tets受体菌,筛选 Tet 转化子,问:Lacr的基因型是什么?并说明原因。
某一限制性核酸内切酶识别序列的碱基数为6个,24kb的一段随机序列出现该酶切割位点的数目是
目的基因和载体的互补末端一定是用同一种限制性核酸内切酶切割产生
粘性末端产生的途径之一,是限制性核酸内切酶通过()DNA产生的
平头末端产生的途径之一,是限制性核酸内切酶通过()DNA产生的。
限制性核酸内切酶主要来源于_______,能识别双链DNA中_______,并同时断裂_______。这类酶可分为两大类,只有第_______类限制性内切酶广泛用于基因操作。
限制性核酸内切酶可以切割烟草花叶病毒的核酸。()
用同一种限制性核酸内切酶切割载体和目的基因后进行连接,采用下列哪种酶处理,可防止载体自身环化( )
判断题: 1. DNA重组即基因重组,是将不同来源的DNA分子通过末端共价连接的方式形成重新组合的DNA分子的过程() 2. 聚合酶链反应(PCR)是一种在体内快速扩增特定基因或DNA序列的方法() 3. 主要用于基因组DNA分析的印迹技术是Southern blotting () 4. 蛋白质的印迹分析,也称为Western blotting或免疫组化() 5. 质粒是生物细胞内固有的、能独立于寄主细胞染色体外而自主复制、并被稳定遗传的一类蛋白分子()。 6. 限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子中某种特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸外切酶().