限制性内切核酸酶 BglⅡ识别的序列为 A GATCT，BamHI 识别的序列为 GGATCC，用它们分别切割载体 DNA和供体 DNA，不必使酶失活，就可以直接通过黏性末端连接法进行连接。
平末端连接法（blunt end ligation）的连接效率比黏性末端连接的效率低得多，所以通常在连接反应体系中适量添加促进大分子凝聚的凝聚剂，以提高平末端 DNA连接的效率。常用的凝聚剂是（）。
如果DNA分子重组时，需要用平端连接，下列哪些方法可形成平末端（）。
如果用限制性内切核酸酶切割双链 DNA 产生 5，突出的黏性末端，则可以用（）；进行 3’末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割 DNA 产生的是 3’突出的黏性末端，可以用（）进行 3’末端标记。
pBR322可以用于黏性末端连接、平末端连接和同聚物接尾法连接，无论用哪种方法连接，都可以用同一种酶回收外源片段。
T4DNA连接酶和 E．coli 连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接。
用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后，可用 E．coli DNA连接酶进行连接。
用超声波处理烟草基因组DNA后，用下列哪一个工程酶处理可以获得平末端片段，用于后续克隆：（）
用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。
进行DNA复制实验时，保留全部DNA复制体系成分，但以DNA聚合酶‖代替DNA连接酶，试分析可能会出现什么后果（）
λ噬菌体的基因组 DNA为（）kb，有（）多个基因。在体内，它有两种复制方式，扩增时（早期复制）按（）复制，成熟包装（晚期复制）则是按（）复制。它有一个复制起点，进行（）向复制。丸噬菌体的 DNA既可以以线性存在又可以环状形式存在，并且能够自然成环。其原因主要是在久噬菌体线性 DNA分子的两端各有一个（）个碱基组成的天然黏性末端。这种黏性末端可以自然成环。成环后的黏性末端部位就叫做（）位点。
不匹配的黏性末端可以通过部分填补后进行连接。
如何将不同DNA分子末端进行连接？
某一染色体 DNA经内切酶 Sal I切割后，产生了若干个具有黏性末端的 DNA片段，将这些片段分别在 T4 DNA连接酶的作用下自身连接成环，然后导入受体细胞，都可以进行独立地复制。
不匹配的黏性末端是不能通过黏性末端连接的。
从小牛胸腺中分离纯化的末端转移酶催化的基本反应是将（），同时释放出离的无机磷。催化反应时不需（），但需要引物，单链 DNA是最好的引物单链 DNA 受体的长度最短需有（）个 dNTP。具有 3，突出末端的双链 DNA是较好的反应底物。二价离子和DNA末端状态对催化反应影响较大，但是用（）为辅助离子，可以催化任何形式的末端（突出的、隐含的、平齐的）加接单核苷酸，但突出的 3’端效率较高。以Mn2+ ／Mg2+作为辅助因子，只能在单链DNA或双链 DNA3’突出端加尾。
用一限制性内切核酸酶切割 Lac+Tetr的质粒载体，已知该酶识别的是4个碱基序列，并产生有两个碱基突出的单链末端，该酶在 lac 基因内有切割位点，并在第二个氨基酸密码子内，该位点可以被任何氨基酸所取代而不影响酶活性。用该酶切割后，用 DNA聚合酶将单链末端补齐为双链的平末端，然后重新连接成环，转化 Lac-Tets受体菌，筛选 Tet 转化子，问：Lacr的基因型是什么？并说明原因。
用同一种酶切割载体和外源 DNA得到黏性末端后，为防止它们自身环化，要用 CIP将它们脱磷酸。
用相同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端是一定（）的；用不同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端一定是（）的。
DNA连接酶连接缺口时要求其中的3′末端必须具有磷酸基团
末端转移酶在合成DNA末端时，单核苷酸底物是加在DNA分子链的--（ ）
细菌DNA连接酶可催化游离的单链DNA或平齐末端的双链DNA之间互相连接，反应需ATP供能。()此题为判断题(对，错)。
用Klenow酶填补的办法可使5&39;黏性末端转变成平末端。这种方法常使DNA上的某些限制酶的识别位点消失。请问，对于下列限制酶，用这种方法处理会不会使它们的识别序列都消失？BamH Ⅰ(G↓GATCC)、Taq Ⅰ(T↓CGA)、BssH Ⅱ(G↓CGCGC)。
Clark发现Taq DNA聚合酶可以不需要模板,在双链DNA的末端加一个碱基是（）
