用限制性内切酶将某种生物的DNA切成不同片段,并把所有片段随机地分别连接到用同样内切酶切过的基因载体上,然后分别转移到适当受体细胞中,如细菌。通过细胞增殖而构成各个片段的无性繁殖系或克隆。如果所制备的克隆数目已多到可把某种生物的全部基因都包含在内时,这一组克隆就成为该种生物的()
就克隆一个基因(DNA 片段)来说,最简单的质粒载体也必需包括三个部分:()、()、()。另外,一个理想的质粒载体必须具有低分子量。
取代型载体(replacement vector)是指同一种限制性内切核酸酶在),DNA 中具有两个切点,外源 DNA通过取代这两个切点间的片段被克隆。
用λ噬菌体作克隆载体时,外源DNA片断越小,克隆的成功率越高。
具有 EcoRⅡ末端的外源片段只能以一个方向插入到 EcoRⅡ末端的载体中。
载体是能携带目的基因进入宿主细胞,实现外源DNA的无性繁殖,或表达有意义的蛋白质的一类DNA分子,是重组DNA技术中一个重要的工具。载体必须具备的特性中不包括()
基因克隆中,低拷贝数的质粒载体是没有用的。
SCID(重症综合性免疫缺乏症)患者的治疗方案包括()。 ①在实验室中通过细胞培养并确认转入的基因表达后,用注射器将重建的转基因T淋巴细胞注射到人体骨髓组织中 ②克隆人体正常的ada基因,构建成重组载体及逆转录病毒转移系统,同时从SCID患者体内分离出免疫系统有缺陷的T淋巴细胞 ③将从SCID患者体内分离出免疫系统有缺陷的T淋巴细胞与携带了正常ada基因的逆转录病毒混合在一起,让病毒感染T淋巴细胞,使正常的ada基因插入到T淋巴细胞的基因组中请排出正确顺序
能够用来克隆 32kb 以下大小的外源片段的质粒载体是()。
表达载体和基因工程一般克隆载体在元件构成上有何差别?
就克隆一个基因(DNA片段)来说,最简单的质粒载体也必需包括三个部分:________________、__________________、______________________。另外,一个理想的质粒载体必须具有低分子量。
载体的功能是(I运送外源基因高效进入受体细胞II为外源基因提供复制能力III为外源基因提供整合能力)()
通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体,但不能判断插入的外源基因是否进行了表达。
基因工程中,利用载体把外源基因转入到宿主细胞后,一部分受体细胞是没有被转化的,这就需要进行()来把他们区分开.
根据噬菌体的包装能力,将野生型λ噬菌体的基因组 DNA 改造成插入型载体,该载体的最小分子大小约为()kb,插入的外源片段最大不超过()kb。
载体是能携带目的基因进入宿主细胞,实现外源DNA的无性繁殖,或表达有意义的蛋白质的一类DNA分子,是重组DNA技术中一个重要的工具。人工构建的含有噬菌体DNAcos序列和质粒载体复制子序列的特殊类型的载体称为()
在LacI标记基因插入外源基因,经IPTG诱导,在X-gal培养基中显白色,为阳性克隆,未插入基因的克隆显蓝色,为()性克隆。
表达载体中多克隆位点往往位于启动子的( ), 终止子的( )
表达载体中多克隆位点往往位于启动子的( ), 终止子的( )
外源基因与载体的连接方式有
酵母双杂交是根据α-互补原理进行分析,结果是蓝斑的克隆子中插入有外源基因。()
与pBV-dps-2x-6his进行重组,构建融合表达载体时,外源目的基因上下游必须设计上XhoI和XbaI酶切位点。()
哺乳动物基因表达载体pcDNA3.1/myc-His(教材P215)上的各种载体元件各具有什么功能?
下列可在基因克隆技术中用作克隆载体的物质是()